期刊简介
《中华胰腺病杂志》反映国内胰腺疾病研究成果，促进国内胰腺病的学术交流，传播国内外胰腺疾病学领域的新理论、新技术和新经验，推动我国胰腺病学的发展。
往期目录
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
-
2019
首页>中华胰腺病杂志
- 杂志名称：中华胰腺病杂志
- 主管单位：中华胰腺病学杂志；胰腺病学
- 主办单位：中国科学技术协会
- 国际刊号：11-5667/R
- 国内刊号：11-5667/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：2002年获第三届华东地区优秀期刊奖期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
稳定过表达hB7-H3基因的人胰腺癌PANC1细胞株的构建
李东宝；李德春；赵华；赵鑫
关键词：胰腺肿瘤, 慢病毒感染, 基因表达, 细胞系, 肿瘤, hB7-H3
摘要：目的 构建稳定过表达hB7-H3基因的人胰腺癌PANC1细胞株,为研究hB7-H3基因的功能提供基础工具.方法 将hB7-H3基因片段插入携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒质粒GV287,构建重组hB7-H3-GV287质粒,转染293T细胞,荧光显微镜下观察GFP的表达,蛋白质印迹法检测hB7-H3蛋白表达;通过慢病毒包装后测定病毒滴度.将表达hB7-H3的病毒感染人胰腺癌PANC1细胞,应用流式细胞仪检测GFP及hB7-H3阳性表达率;实时PCR及蛋白质印迹法检测感染细胞的hB7-H3mRNA及蛋白表达.以自身环化的GV287质粒作为阴性对照(NC).结果 重组质粒的PCR扩增片段约1 368 bp,NC质粒无扩增产物,重组质粒DNA测序结果与设计的片段完全一致,表明重组hB7-H3-GV287质粒构建成功.重组质粒转染后293T细胞表达hB7-H3蛋白,而NC质粒转染后细胞无hB7-H3蛋白表达.重组hB7-H3质粒经慢病毒包装后的病毒滴度为2×108 TU/ml.慢病毒感染人胰腺癌PANC1细胞后,细胞hB7-H3阳性表达率、hB7-H3 mRNA及蛋白表达分别为94.3％、5.09±0.24、2.85±0.27,较NC慢病毒感染的18.5％、1.28±0.53、0.44±0.69显著增加,差异均有统计学意义(P值均＜0.01).结论 稳定过表达hB7-H3基因的人胰腺癌PANC1细胞株的构建成功.
友情链接