期刊简介
《中华胰腺病杂志》反映国内胰腺疾病研究成果,促进国内胰腺病的学术交流,传播国内外胰腺疾病学领域的新理论、新技术和新经验,推动我国胰腺病学的发展。
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- 杂志名称:中华胰腺病杂志
- 主管单位:中华胰腺病学杂志;胰腺病学
- 主办单位:中国科学技术协会
- 国际刊号:11-5667/R
- 国内刊号:11-5667/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:2002年获第三届华东地区优秀期刊奖期刊收录:CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
低氧培养对胰腺癌 CFPAC-1细胞 miR-301 a表达的影响
朱麟;张坤东;夏翔;黄陈;裘正军
关键词:胰腺肿瘤, 缺氧, 上皮间质转化, 微RNAs
摘要:目的:观察低氧培养胰腺癌CFPAC-1细胞后miR-301 a表达的变化,探讨miR-301 a的可能作用机制。方法在1%O2环境中培养胰腺癌细胞CFPAC-1,相差显微镜下观察细胞形态变化。蛋白质印迹法检测细胞低氧诱导因子HIF-1α、miR-301a及其靶基因FOXF2,上皮型标志物E-cadherin、ZO-1、β-catenin,上皮间质转化(EMT)标志物Vimentin、N-cadherin、Fibronectin的表达。构建miR-301a慢病毒表达载体,建立稳定转染miR-301a的细胞株,以转染与miR-301a不匹配( miR-301a-NC)的细胞作为对照组,观察细胞形态变化,检测FOXF2、上皮型及EMT标志物表达,划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力。结果 CFPAC-1细胞在低氧环境培养后细胞外形不规则、多呈棱形、伪足较多,细胞间连接松散,向间质细胞形态改变。以常氧培养细胞的表达量为1,低氧培养4 d后细胞miR-301a表达量为2.82±0.01,HIF-1α为2.17±0.36,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin分别为5.48±0.16、1.16±0.03、1.30±0.03,均显著上调;FOXF2、E-cadherin、ZO-1、β-catenin 分别为0.45±0.05、0.61±0.05、0.45±0.02、0.37±0.02,均显著下调,差异均有统计学意义(P值均<0.01)。以转染miR-301a-NC细胞的蛋白表达量为1,转染miR-301a细胞的miR-301a、Fibronectin、Vimentin、N-cadherin 表达量分别为7.09±0.42、15.6±0.10、1.24±0.05、1.37±0.01,表达均显著上调;FOXF2、ZO-1、E-cadherin、β-catenin表达量分别为0.33±0.03、0.71±0.02、0.67±0.06、0.47±0.03,表达均显著下调,差异均有统计学意义(P值均<0.01)。转染miR-301a-NC组、稳转miR-301a组CFPAC-1细胞18 h的覆盖划痕区面积分别为(54.68±43.1)%、(94.82±2.18)%;24 h的穿膜细胞数分别为(25±6)、(95±11)/100倍视野,稳转miR-301a组显著高于转染miR-301a-NC组,差异均有统计学意义( P <0.05或<0.01)。结论低氧培养后CFPAC-1细胞出现EMT改变,miR-301a表达上调。其机制可能是miR-301a通过抑制FOXF2表达从而促使胰腺癌细胞EMT。
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