期刊简介
《中华胰腺病杂志》反映国内胰腺疾病研究成果，促进国内胰腺病的学术交流，传播国内外胰腺疾病学领域的新理论、新技术和新经验，推动我国胰腺病学的发展。
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- 杂志名称：中华胰腺病杂志
- 主管单位：中华胰腺病学杂志；胰腺病学
- 主办单位：中国科学技术协会
- 国际刊号：11-5667/R
- 国内刊号：11-5667/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：2002年获第三届华东地区优秀期刊奖期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
稳定表达EGFP-LC3的AR42J细胞系的建立
吴敏；李洁；刘晓；李钦芳；郭晓榕；湛先保
关键词：慢病毒感染, 自噬, 细胞系, AR42J细胞
摘要：目的 建立稳定表达增强型GFP (EGFP)-LC3的AR42J细胞.方法 利用慢病毒过表达载体Lentiviral-EGFP-LC3包装成慢病毒,感染大鼠胰腺腺泡细胞AR42J.以Lentiviral-EGFP感染作为阴性对照.通过倒置荧光显微镜观察及流式细胞分析仪检测病毒感染效率,蛋白质印迹法检测稳定传代细胞株的LC3蛋白表达.用毒胡萝卜素处理细胞建立内质网应激模型,采用蛋白质印迹法检测应激的AR42J细胞的LC3、PERK蛋白表达.结果 AR42J细胞的Lentiviral-EGFP-LC3感染效率＞85％,并能稳定传代.Lentiviral-EGFP-LC3感染的AR42J细胞的LC3 mRNA表达量为未感染细胞的(9.14±0.32)倍;LC3蛋白阳性表达并有EGFP-LC3融合蛋白的表达.Lentiviral-EGFP感染的AR42J细胞的LC3 mRNA表达量为未感染细胞的(1.08 ±0.07)倍,无LC3蛋白表达,仅有GFP表达.与未感染组比较,EGFP-LC3组的LC3 mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05),而EGFP组的差异无统计学意义.结论 成功构建了稳定表达EGFP-LC3的大鼠胰腺外分泌细胞AR42J,为进一步研究急性胰腺炎与自噬的关系提供了新的细胞模型.
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