期刊简介

《中华胰腺病杂志》反映国内胰腺疾病研究成果,促进国内胰腺病的学术交流,传播国内外胰腺疾病学领域的新理论、新技术和新经验,推动我国胰腺病学的发展。

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  • 杂志名称:中华胰腺病杂志
  • 主管单位:中华胰腺病学杂志;胰腺病学
  • 主办单位:中国科学技术协会
  • 国际刊号:11-5667/R
  • 国内刊号:11-5667/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:2002年获第三届华东地区优秀期刊奖期刊收录:CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
中华胰腺病杂志2011年第06期

KAI1对人胰腺癌MiaPaCa-2细胞自噬的影响

吴春燕;郭晓钟;王华

关键词:胰腺肿瘤, 基因, 肿瘤抑制, 自噬, KAI1
摘要:目的 观察感染Ad5-KAI1前后人胰腺癌细胞MiaPaCa-2自噬水平的变化,并初步探讨其机制.方法 应用无KAI1表达的人胰腺癌细胞MiaPaCa2,通过感染带有KAI1目的基因的复制缺陷型腺病毒Ad5-KAI1使细胞表达KAI1,以Ad5 -null感染作为阴性对照,亲本细胞为空白对照.用透射电镜观察细胞自噬小体,共聚焦显微镜观察自噬标志LC3颗粒.应用阻断剂PD98059和LY294002干预细胞,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白beclin 1、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ及ERK-1/2、磷酸化ERK-1/2(p-ERK-1/2)、AKT、p-AKT的表达.结果 以100 MOI Ad5-KAI1感染细胞24h,表达KAI1蛋白的细胞达(84.97±8.56)%;LC3颗粒从4个左右增加到20个以上;细胞线粒体肿胀、变性,胞质内双层膜样结构增加;Beclinl表达增加(1.4±0.3)倍,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达增加(8.00 ±2.78)倍.PI3K阻断剂LY294002预处理细胞后可以有效地抑制MiaPaCa-2细胞AKT的磷酸化(2.756降至1.516),但不能抑制LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值的增加(0.770增加到1.403).ERK阻断剂PD98059预处理细胞后不仅可以有效地抑制MiaPaCa-2细胞ERK的磷酸化(1.637降至0.403),而且可以抑制beclin 1蛋白表达的上调(2.377降至1.150)和LC3-Ⅱ/Lc3-Ⅰ比值的增加(2.225降至0.680).结论 KAI1明显促进MiaPaCa2细胞内自噬,它是通过ERK而不是AKT磷酸化途径促进自噬的.